El Mundo a través del Microscopio I

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Microscopio Óptico: Manejo y  visualización de preparados


El microscopio óptico invertido se utiliza para ver placas de cultivo. Los objetivos se encuentran debajo de la platina.

Cuando estamos estudiando Histología, Anatomía o Botánica, por dar algunos ejemplos, tenemos que enfrentarnos con una de las herramientas más importantes del laboratorio, el Microscopio Óptico.


Introducción al uso del microscopio óptico


Aprovechar esta herramienta nos permite entrenar el ojo para entender los preparados, poder hacer un nexo entre lo que leemos en los libros y las láminas que aparecen en los Atlas que consultamos en la Facultad o las fotos que nos proporciona la Web.


Muchas veces, entender una imagen nos ayuda a terminar de comprender algo que venimos leyendo y a veces cuesta retener.

Es por estas razones, y por mi experiencia como docente de ciencias naturales, que me parece útil enfatizar en el buen uso del microscopio. Espero que esta guía te resulte útil y puedas aplicar estos conceptos en tus estudios.

Partes del microscopio óptico:


Vamos a empezar conociendo el equipo. En la Figura 1 se pueden observar las partes que componen un microscopio óptico binocular:

Descripción de los principales componentes del microscopio óptico.


Figura 1. Detalle de las partes que componen el microscopio óptico.

 

 Descripción de los componentes del microscopio óptico


Oculares: son las lentes en los que el observador posiciona sus ojos. Estos lentes captan y amplían la imagen formada en los objetivos. En general, los oculares proporcionan un aumento de 10X.Cabezal: permite mover los oculares de forma lateral para ajustar la distancia entre ellos de acuerdo a la distancia de los ojos del observador. También se puede mover hacia los costados para que otro observador pueda utilizarlo son mover le microscopio entero.


Revólver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos. Debe rotarse para cambiar los objetivos alineándolos con el ocular. Es muy importante cambiar los objetivos desde el revólver para no desajustarlos y que se descalibre el sistema óptico.


Objetivos: son las lentes que se fijan mediante una rosca al revólver. Cada objetivo tiene un aumento diferente que se codifica así: 4X, 10X, 20X, 40X y 100X. Además, se informa en el mismo un valor de gran importancia denominado Apertura Numérica (AN). Este número se define como la medida de la capacidad del sistema de lentes para colectar la luz. Cuanto mayor es la AN, más nítidas suelen verse las imágenes (Figura 2).

Por último, podemos encontrar un anillo de color en cada objetivo que se utiliza como un código para saber si es un objetivo de 4X, el anillo suele ser rojo y si es de 40X, el anillo suele ser azul (Figura 3). Cuando observamos la muestra con un determinado objetivo, la magnificación obtenida real es el resultado de multiplicar el aumento del objetivo por el aumento del ocular. 

Por ejemplo, si estamos viendo un preparado a 40X, la magnificación sería el resultado de aumento del objetivo (por ejemplo, 40X) multiplicado por el aumento del ocular, 10X. Esto significa que estamos viendo una imagen con una magnificación de 400X (400 veces más grande que lo que es capaz de observar el ojo desnudo).

Detalle de un objetivo del microscopio óptico


Figura 2. La Apertura Numérica (AN) es un número que indica el rango de ángulos sobre los cuales el sistema puede aceptar o emitir luz. Un valor de AN mayor garantiza una mejor calidad del objetivo y en consecuencia un avisión más definida de la muestra.


Objetivo del microscopio óptico

Figura 3. El código de colores de los objetivos indican el aumento de cada uno. En general el anillo rojo identifica al objetivo 4X y el anillo azul al objetivo 40X.


Platina: Es una plataforma horizontal metálica con un orificio central. Sobre la platina se coloca la muestra de forma que quede sobre el orificio que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada debajo (foco).


Pinzas sujetadoras: Dos pinzas, sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera que permite mover la preparación. Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el enfoque.

Condensador: es la lente que concentra los rayos de luz sobre la muestra.


Diafragma: es un dispositivo regulable que modifica la cantidad de luz que llega al condensador. Se encuentra entre el foco y el condensador.


Foco: es una fuente de luz que dirige los rayos luminosos al condensador. En general se puede regular su intensidad. Por ejemplo, si queremos observar algo a 40X, seguramente tenemos que subir la intensidad de la fuente de luz.


Tornillos macro y micrométrico: Son los tornillos que permiten el enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico, permite desplazamientos amplios para un enfoque inicial (cuando estamos usando el objetivo 4X) y el micrométrico, desplazamientos muy cortos, para un enfoque más preciso (movemos el micro cuando utilizamos los objetivos 20X, 40X y 100X). Es importante no usar el macro para el enfoque fino porque por un lado se dificulta mucho enfocar debido a que el objetivo se acerca o se aleja de la muestra con desplazamientos muy amplios corriendo el riesgo de romper el portaobjetos con la muestra y dañar la lente del objetivo.


Brazo: Es la estructura que sujeta el cabezal, la platina y los tornillos de enfoque. El microscopio debe movilizarse siempre desde el brazo, de esta forma evitamos que el microscopio se descalibre.


Base: Es la parte inferior del microscopio. Suele ser antideslizante y pesada para que el microscopio tenga el menor movimiento posible.


Finalmente podemos sacar unas fotos y armar nuestro propio banco de imágenes:


La técnica histológica nos permite realizar preparados de tejidos vegetales y animales para ser observados al microscopio óptico. Esta técnica se ha utilizado desde el siglo XVII y aún es empleada por médicos patólogos, estudiantes de medicina, docentes y botánicos. Un buen preparado puede durar décadas debido a las técnicas de preservación que se utilizan para tratar las muestras.

Algunos ejemplos de preparados que he realizado para dar clases:


tráquea y esófago


Flor rosa al microscopio


ala de mosca vista al microscopio


Figura 4: Corte histológico de tráquea y esófago. Tinción de Tricrómico de Masson. Geranio en flor, se observa un pétalo al microscopio donde cada célula está pigmentada. Ala de la mosca de la fruta, Drosophila melanogaster.

Guardado y mantenimiento del microscopio:


Para preservar el microscopio, es necesario tener en cuenta algunos cuidados. Una vez finalizadas las observaciones, deben seguirse los siguientes pasos:

  1. Bajar la platina completamente utilizando el tornillo macrométrico y se apaga la fuente de luz.
  2. Una vez que la platina se encuentra baja, retirar la muestra.
  3. Desde el revólver mover los objetivos de forma que el 4X quede alineado a la platina.
  4. De ser necesario, limpiar la lente de los objetivos, sin sacarlos del revólver, con un hisopo que no pierda partículas, humedecido con etanol 96%. También puede utilizarse un papel tissue apoyándolo suavemente y sin refregar sobre la lente del objetivo. Esto es particularmente importante si se ha utilizado el objetivo 100X con aceite de inmersión.
Finalmente, se cubre el microscopio con una funda para evitar la acumulación de polvo.


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Referencias


Soy Licenciada en Ciencias Biológicas y tengo un PhD en Química Biológica. Escribo esta página basada en mi experiencia como docente e investigadora y utilizo fuentes de información confiables para la redacción de los artículos que dejo a continuación:





Parece que a alguien también le interesó el mundo micro……



Gatito y microscopio



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